抗体亚型鉴定

抗体，称为免疫球蛋白，通常是“Y”形，它们是由b细胞分泌的分子。抗体是由两条相同的重链（H）和轻链（L）通过二硫键组装的四肽链结构。每条链具有恒定区（C）和可变区（V）。根据抗体轻链C区氨基酸组成和排列的不同，可将其分为κ和λ两型。抗体的V区又可以细分为CDR(互补决定区)和FR(骨架区)。基于铰链区的大小，链间二硫键的位置和分子量的不同，抗体可以进一步细分为四种亚型。鼠源IgG可以分为IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3。在杂交瘤单抗制备完成后，可以进行抗体亚型鉴定。

服务内容

  • 客户提供：杂交瘤细胞上清；腹水；纯化单抗
  • 鉴定范围：IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3及IgM，IgA，κ，λ
  • 项目周期：1周

亚型鉴定实验流程

抗体亚型鉴定

    ①：酶标板预先包被了针对小鼠IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG3及IgM，IgA，κ，λ的特异性抗体；
    ②：将待测样品处理后加入到酶标板中；
    ③：加入荧光标记抗体孵育；
    ④：孵育一段时间后，显色液显色，判断抗体类型。

抗体亚型鉴定意义

不同亚型抗体在抗体结构（例如Fc区结构、是否以多聚体形式存在等）及功能上（例如补体激活、半衰期等）有所区别，进行抗体亚型鉴定能够更加清楚的了解手中抗体的结构及功能，从而更好的应用于下游实验。

IgG抗体亚型间的比较

对比项目 IgG1(γ1) IgG2(γ2) IgG3(γ3) IgG4(γ4)
分子量（kDa） 150 150 170 150
氨基酸隐藏区域 15 12 62 12
H链间二硫键 2 4 11 2
半衰期（天） 14-21 14-21 7 14-21
平均成人血清含量（g/L） 6.98 3.8 0.51 0.56
相对丰度（%） 60 32 4 4

相关阅读