N端测序–Edman降解法

Edman化学降解法是蛋白质N-端测序技术的关键技术，其基本原理是包括通过异硫氰酸苯脂（PITC）与蛋白质的N-端残基的偶联，苯氨基硫甲酰酞（PTC-肽）环化裂解，和噻唑呤酮苯氨（ATZ）转化为苯异硫尿氨基酸（PTH-氨基酸）三个主要的化学步骤，每个循环从蛋白质N端裂解一个氨基酸残基，同时暴露出新的游离的氨基酸进行下一个Edman降解，然后通过转移的PTH-氨基酸鉴定实现蛋白质序列的测定。

尽管Edman法技术已应用较多，但仍有不足之处，这导致此种方法的检测成功率不足50%。一般原因是Edman降解法对于样品的纯度浓度要求高并且不能解决N端封闭的测序问题（环化、封闭）、被修饰的蛋白不能给出确切的信号等。j9九游会生物在此技术基础上加入质谱法，质谱法不受N末端封闭的限制，能对侧链基团翻译后加工或化学修饰进行定位，灵敏度有提高，因而具有区别于传统Edman降解法的优点。